藥廠凈化棚沉降菌測試標準操作規程

1、菌體：細菌檢查后，由一個或好多個細菌繁殖而產生的一病菌集落，通稱CFU。通常用數量表明。

2、測試標準：地基沉降法，即利用當然地基沉降基本原理搜集在空氣中的微生物物體于培養液培養皿，經48個小時以上塑造，在適合的標準下讓其繁衍到可以看到的菌體數，來鑒定清潔自然環境內的活微生物菌種數，并借此來鑒定凈化棚的潔凈度等級。

3、常用的儀器設備和機器設備

1）髙壓消毒鍋：應用時參考文檔GZ-ZL-SOP-066-00開展實際操作。

2）恒溫培養箱：務必按時對培養箱的溫度表開展計量檢定。

3）細胞培養皿：一般選用中90mm×15mm硼氯化鎂夾層玻璃細胞培養皿。應用前將細胞培養皿放置121℃濕熱滅菌20分鐘。

4、培養液：一般營養成分瓊脂培養液。將培養基加溫融化，制冷至約45℃在無菌技術前提下將培養液引入細胞培養皿，每皿約15m1。待瓊脂培養液凝結后，將培養液培養皿放進30～35℃恒溫培養箱中塑造數鐘頭，若培養液培養皿上確實沒有菌體生長發育，就可以供取樣用，制取好的培養液培養皿應在2～8℃的條件中儲放。

5、測試流程

1）取樣方式：將已制取好的細胞培養皿置放在預先確定的抽樣點，開啟細胞培養皿蓋，使培養液表層曝露0.5鐘頭，再將細胞培養皿蓋緊蓋后顛倒。
2）塑造，時間不少于48鐘頭。每次培養液應該有對比實驗，查驗培養液自身是不是環境污染，可每次選中3只細胞培養皿作對比塑造。

3）菌落計數：用人眼立即記數，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗，有無忽略。若細胞培養皿上面有2個或2個以上菌體重合，可辨別時仍以2個或2個以上的菌落計數。

6、常見問題

1）檢測用品要做殺菌解決，以保證檢測的穩定性、準確性。

2）采用一切對策避免 人為因素對樣版的環境污染。

3）對培養液、塑造標準以及他主要參數作詳盡的紀錄。

4）因為病菌品種繁多，區別甚大，記數時一般用電子散射光于細胞培養皿反面或正臉認真觀察，不必漏計細胞培養皿邊沿生長發育的菌體，并須留意細菌菌落與培養液沉淀的棚別，必需時要高倍顯微鏡辨別。

5）取樣前要認真仔細每一個細胞培養皿的品質，如發覺質變、損壞或環境污染的應去除。

7、檢測標準

1）測試狀態

（1）沉降菌檢測前：被測試凈化棚（棚）的溫濕度記錄須做到要求的規定，負壓差、務必操縱在標準值內。被檢測凈化棚（棚）已消毒。

（2）測試狀態有靜止和信息二種，并在匯報中標明測試狀態。

（3）測試工程師：測試人員務必配戴合乎自然環境潔凈度等級等級的工作服裝。靜態數據檢測時，棚里測試工程師不可超過2本人。

2）檢測時間

（1）對單邊流，如100級凈化棚間內及層.流操作臺，檢測應在凈化空調機組正常的運作不少于10分鐘后逐漸。

（2）對非單方面流，如10000級、100000級以上的凈化棚間，檢測應在凈化空調機組正常的運作不少于30分鐘逐漸。

8、沉降菌記數
1）至少取樣點數量：可按表1明確。在達到至少測等級的與此同時，還宜達到至少細胞培養皿數，見表2。

表1至少取樣點數量

注：表格中的總面積針對單邊流凈化棚就是指排風總面積，針對非單方面流凈化棚就是指棚間總面積。

表2至少細胞培養皿數

2）取樣點的布局：工作中棚測試用例部位距地0.8～1.5m上下（稍高于工作臺面）?？稍谥饕O備或重要工作中主題活動范疇處提升測量點，取樣點的安排應務求勻稱，防止取樣點在某 部分棚域過度集中化，某部分棚域過度稀少。

3）紀錄：檢測報告中應紀錄棚間溫度、空氣濕度、壓力差、測試狀態及數據測試。

4）結果測算：用記數方式得到每個細胞培養皿的菌體數。

均值菌體數的測算見上式：m1 m2 …… mn

均值菌體數m=n

式中：m為均值菌體數；m1為1號細胞培養皿菌體數；m2為2號細胞培養皿菌體數；mn為n號細胞培養皿菌體數；n為細胞培養皿數量。

5）結果鑒定：用均值菌體數分辨凈化棚的空氣中的微生物菌種。

6）凈化棚（棚）內的均值菌體數務必小于所選中的標準（見表3）。

表3

7）若某凈化棚（棚）的平均菌體數超出標準，則務必對于此事棚域優先消毒殺菌，隨后再次檢測2次，檢測結果務必達標。

關鍵論文參考文獻：國家行業標準GB/T 16294-1996

全文由來：http://m.aliil.com/